狗狗通过什么得狂犬？
犬的狂犬病（Rabies in Dogs）是由狂犬病病毒(Rabies virus)引起的急性中枢神经系统传染病，犬被携带病毒的动物咬伤或舔舐伤口后感染，病毒从伤口侵入，首先进入神经细胞内，然后到脑和脊髓的神经元中增殖，引起宿主发病[1]. 潜伏期平均30d，最短10d，最长可达9年之久；临床症状以精神、行为异常为主症，包括狂暴症、嗜睡、麻痹等。一般病程不超过6周，病死率高达100%。
由于狗是易感性最高的动物之一且易暴露于外界[2]，所以目前绝大多数地区的病例都是源于犬感染狂犬病毒而引发人类患病的报道。我国将携带狂犬病毒的病兽视为禁止经营的动物产品，并规定凡经营、运输、屠宰或加工的动物产品，必须检疫合格并取得《动物防疫条件合格证》方可销售[3]。 因此，对犬群进行及时有效的疫苗接种是预防犬患狂犬病最有效的方法，同时也是防止人受感染的重要措施之一。
疫苗的作用机理主要是刺激机体产生相应抗体，从而起到保护作用，但由于接种时间不同所产生的抗体的效价也不一样，并且存在个体差异导致有的犬只接种后不能产生足够的保护力。此外疫苗还有一定副作用，例如接种后的犬只可能会出现发热、注射部位肿胀等症状。 所以只有当犬只体内的保护性抗体的浓度达到一定的阈值时才能被认为具有了免疫效力，也就是通常所说的疫苗保护期。 目前普遍采用的狂犬病疫苗的种类有二免灭活疫苗和三免灭活疫苗两种，在国内外均有广泛应用。其中三免灭活疫苗因为效果较好且方便使用而被广泛采用。
本研究以二免灭活疫苗为例，探讨其预防犬患狂犬病的免疫保护效果及其影响因素。
实验方法：
1.试剂与仪器： 狂犬病疫苗（Rabies Vaccine，Re-40，Vero cell;Re-80，Vero细胞；AstraZeneca， Sweden); 酶标山羊抗兔IgG抗体稀释液（上海西唐生物科技公司）; 辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG抗体（北京中山生物科技公司）： 酶标仪（Thermol Molecular Devices， USA)； 可调移液器； 超净台； 培养箱； 显微镜； 离心管； 微量可调移液器； 枪头； 96孔板； 无菌纱布； 注射器； 1mL和5mL注射器各一个； 手术刀、剪刀、镊子； 酒精灯。
2.接种方法：
选取健康成年犬48只，随机分为四组，每组12只，分别用二免灭活狂犬病疫苗Re-40 和 Re-80 进行免疫接种，每针0.5mL/只，皮下注射，第1天、7天和21 天免疫各一次，连续三次。于第一次接种疫苗同时及末次免疫后一周采集犬血清制备抗原抗体复合物，用于抗体检测。
3.免疫抗体检测：
按照试剂盒说明书操作，利用ELISA法检测接种二免狂犬病疫苗犬血清中的IgM、 IgG抗体水平，具体步骤如下： ①制备标准品：以包被酶标的牛血清白蛋白为对照，制作标准曲线，测定其OD值，根据以下公式计算出抗体滴度：抗体滴度=（样品吸光值－空白吸光值）÷（对照吸光值－空白吸光值）×10^6，结果以log2表示。
②用0.05mol/L pH 9.6 碳酸盐缓冲液充分溶解抗原，取0.1mL加入到2mL双蒸水中，配成1∶100的抗原溶液备用； ③用双蒸水将血清作10倍梯度稀释至10-6；
④向已预热并摇匀的酶标板上依次加入待检犬血清和稀释的抗原，轻轻振荡混匀，37℃温育30min，取出放置2min，洗板两次；加封闭液，37℃孵育30min；
⑤弃去封闭液，洗板四次；
⑥加入酶标山羊抗兔抗体工作液，37℃孵育30 min，洗板五次；
⑦加入底物溶液，37℃孵育15min，最后加终止液，在酶标仪上读取OD450nm值。
4.数据分析：
结果如表1所示：
从表中可以看出，无论是哪种疫苗，在第0天时，所有犬只所测得的抗体滴度都相差不大，随着免疫时间的增加，各个组的抗体滴度呈现不同的变化趋势（P<0.05)，说明在相同的剂量下，不同的疫苗之间对犬产生的抗体效价是有明显差别的。
在三种试验的疫苗当中，只有Re-40 在第二次免疫后产生了显著性的升高（P<0.05）。 而其他两个疫苗虽然也达到了免疫保护的效果，但差别并不是很明显，尤其是第三次免疫结束后，两组之间的抗体数值已经比较接近。由此推测可能是因为Re-40 的抗原纯度最高，因此在犬只体内能够诱导生成大量的抗体，从而表现出更好的疗效。 从本次检测结果来看，二免灭活疫苗Re-40 在犬体内诱导产生抗体的能力最强， 是一种较好的疫苗。